随着国际形势恶化（经济危机和法西斯扩张），美苏两国关系也发生了微妙变化。罗斯福入主白宫后，充分估量了苏联在国际舞台上的作用，决定与苏联建立外交关系（1933年建交），为后来两国合作对抗法西斯铺平道路。随后，苏联加入国联。
珍珠港事件后，美、苏等26国签署《联合国家宣言》（1942年1月1日），正式形成国际反法西斯联盟，对二战胜利发挥了关键性作用。1945年4月25日，两国军队在德国易北河会师，标志着欧洲战场即将取得胜利。
第二次世界大战期间，意识形态和社会制度完全对立的美苏两国的密切合作，是战争取得最终胜利的关键。两国也在这场战争中逐渐掌握了全球战略的主导权，并建立了雅尔塔体系。
然而，在此过程中，两国的矛盾也日渐凸显。
二战后，战略目标根本对立使得美苏之间的矛盾迅速激化，在欧亚大陆乃至全球展开激烈对抗，开始接近半个世纪的冷战。
美苏冷战的根源，是传统文化迥异与意识形态和社会制度的差异。
冷战期间，美苏关系曾三度缓和：
第一次是20世纪50-60年代，当时赫鲁晓夫上台后，提出以缓和取代全面对抗的“三和路线”（和平共处、和平竞赛、和平过渡），在此期间美苏进行了“戴维营会谈”（1959年9月15日），开创了两个超级大国通过首脑会晤形式解决国际争端的先例。
第二次是20世纪70年代，当时中美关系实现正常化，苏联担心中美关系解冻会威胁苏联的战略地位，急切改善美苏关系。1972年5月，尼克松访问莫斯科，双方在莫斯科进行了包括首脑会晤在内的一系列会谈，确认以“和平共处”、“缓和”作为两国关系的指导原则。
第三次是20世纪80年代，戈尔巴乔夫提出“新思维”，两国连续举行四次首脑会晤，一个重要的成果是1987年12月签署的《中导条约》（去年8月废除），随后苏联从阿富汗撤军。
然而，美苏之间意识形态和社会制度的分歧以及国家利益的冲突，使得上述三次缓和都只持续了较短时间，对抗依旧是冷战期间美苏关系的主流。
冷战后，美俄关系也是一波三折，两国在90年代初和9·11事件后，先后经历了两次短暂“蜜月期”。
但由于缺乏政治互信，依然存在意识形态分歧，两国之间总体上还是处于非敌非友、竞合并存的状态。从美苏到美俄，两国关系可谓是跌宕起伏。
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