1966年6月6日到10日，球芽孢杆菌（bacillus globigii）被投放到纽约地铁。这次，特别行动部门使用各种办法投送生物制剂，比如把细菌装入一只灯泡，带入地铁列车，在列车行驶时投入地铁隧道。
这次实验更加令人满意：仅仅1个小时，研究人员就在地铁线路的首发站和终点站检测到了细菌。换句话说，细菌传播覆盖整条线路只用了1个小时。
(此事直到1980年才公开，这是《华盛顿邮报》1980年4月22日相关报道。此事有一个细节，纽约警察和地铁管理部门当时未发现情况。这说明，大城市单靠常规执法部门很难防御生物武器袭击。)
这些测试有一个共同特点：都是暗中破坏式。美国在投放时没有使用轰炸机或者远程导弹，而是派出特工人员，深入目标区域，定点投放生物制剂，而且效果都很好，甚至在某次试验中真的导致了人员伤亡。
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